皮內(nèi)試驗(yàn)是在模擬異位性皮炎——使皮膚接觸空氣抗原，并觀察其反應(yīng)。試驗(yàn)的特異性為50-90%（排除其他瘙癢癥特異性將提高），敏感性為90%。對(duì)于季節(jié)性發(fā)病的動(dòng)物，試驗(yàn)時(shí)間最好選擇在癥狀出現(xiàn)的2-3個(gè)月后。

操作程序：

1．將動(dòng)物鎮(zhèn)靜并側(cè)臥。賽拉嗪（Xylazine）0.5-0.75mg/kg，或美托咪定（medetomidine）10-20μg/kg，是適合的鎮(zhèn)靜劑。很多其他的麻醉或鎮(zhèn)靜劑會(huì)降低皮內(nèi)試驗(yàn)的反應(yīng)性。

2．將胸廓輕柔剃毛，面積為15×10cm。

3．預(yù)先用黑色記號(hào)筆標(biāo)出注射點(diǎn)。

4．將每種抗原以0.05ml的劑量注射入標(biāo)記點(diǎn)對(duì)應(yīng)的真皮內(nèi)，同樣劑量的組胺（1：100，000）作為陽(yáng)性對(duì)照,生理鹽水作為陰性對(duì)照。

5．10-20分鐘后讀取反應(yīng)結(jié)果。皮膚會(huì)出現(xiàn)風(fēng)疹樣變化,陽(yáng)性對(duì)照為4分，陰性對(duì)照為0分。其他注射部位通過(guò)風(fēng)疹面積、發(fā)紅程度、隆起高度與陽(yáng)性和陰性對(duì)照相比，人為給予評(píng)分。最高分為4分，最低分為0分。

6．少數(shù)病例會(huì)在24-48小時(shí)后出現(xiàn)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，需要主人在家觀察，或住院觀察。

7. 最為脫敏治療的抗原種類不要超過(guò)10種，注射劑量從低濃度向高濃度逐漸遞增，注射間隔逐漸拉長(zhǎng)，從最初的間隔一天，到最后可能保持在10-20天注射一次。通常為終生性治療。

皮內(nèi)注射時(shí)注射技術(shù)問(wèn)題導(dǎo)致局部刺激，可能引起假陽(yáng)性反應(yīng)，例如針頭損傷、注入空氣和抗原容量大于對(duì)照組。假陰性反應(yīng)可能緣于藥物干擾（例如糖皮質(zhì)激素、抗組胺藥，降血壓藥等）。理論上講，應(yīng)激可以導(dǎo)致自體糖皮質(zhì)激素升高，使皮膚過(guò)敏試驗(yàn)無(wú)反應(yīng)。注射技術(shù)錯(cuò)誤，例如注射于皮下而不是皮內(nèi)；或是抗原量過(guò)低，讓皮膚不能形成應(yīng)有的反應(yīng)；抗原過(guò)期或過(guò)度稀釋等因素均使結(jié)果為假陰性。

皮內(nèi)試驗(yàn)前要停用所有糖皮質(zhì)激素和抗組胺藥（見表1）；試驗(yàn)時(shí)需要剃毛，并鎮(zhèn)靜動(dòng)物；另外需要購(gòu)買多種抗原試劑，并合理保存；醫(yī)生判讀結(jié)果的能力需要特殊的培訓(xùn)。由于上述原因，在歐美等國(guó)家，做皮內(nèi)試驗(yàn)的病例需要轉(zhuǎn)診至皮膚病專科醫(yī)院。

目前世界知名的犬過(guò)敏原生產(chǎn)公司有Greer、Heska、Artuvetrin等。國(guó)際衛(wèi)生組織已經(jīng)建立了人醫(yī)用抗原標(biāo)準(zhǔn)化，而獸醫(yī)用抗原則沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)化。因此無(wú)從得知哪家公司的產(chǎn)品（包括人醫(yī)和獸醫(yī)）更有優(yōu)勢(shì)，。獸醫(yī)臨床常將水性抗原提取物用于皮內(nèi)試驗(yàn)。抗原的儲(chǔ)存基質(zhì)是甘油。抗原均為濃縮制劑，更適合作為疫苗，用于脫敏治療，稀釋后才能用作皮內(nèi)試驗(yàn)的試劑。通常稀釋后的抗原保存時(shí)間變短，即使正確存放，通常必須在8周內(nèi)用完。

皮膚病醫(yī)生根據(jù)當(dāng)?shù)氐闹参锶旱冗x擇抗原,抗原種類越多越好，當(dāng)然費(fèi)用也會(huì)隨之升高。當(dāng)?shù)乜乖男畔⒖梢缘竭^(guò)敏實(shí)驗(yàn)室、獸醫(yī)皮膚病專科醫(yī)院、人醫(yī)變態(tài)反應(yīng)科室和氣象局等處了解，也可以查閱獸醫(yī)過(guò)敏性皮膚病的文獻(xiàn)和教科書。需要注意的是，對(duì)人重要的抗原未必對(duì)犬也同樣重要。即使植物和傳粉很確定的區(qū)域，植被和氣候也存在變數(shù)。所以應(yīng)該每年評(píng)估皮內(nèi)試驗(yàn)用抗原的種類，并且制定新的抗原種類，很少出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)的抗原應(yīng)該剔除掉。大量環(huán)境抗原涉及于犬AD的發(fā)病機(jī)制中。

眾多專家和學(xué)者通過(guò)皮內(nèi)試驗(yàn)總結(jié)了AD犬反應(yīng)陽(yáng)性的空氣抗原種類。常用抗原包括屋塵、表皮螨屬、各種皮屑、樹種、草和雜草、花粉、霉菌及其他混雜抗原。表皮螨屬包括：美洲塵螨（也稱粉塵滿）、歐洲塵螨（也稱房塵螨或屋塵螨）、粗腳粉螨、腐食酸螨；上皮抗原包括：人上皮、馬上皮、貓上皮、犬上皮、綿羊上皮、混合羽毛、鼠上皮、兔上皮、豚鼠上皮、家禽上皮、金絲雀上皮等；樹種包括：樺樹、柳樹、樅樹、雪松、槭樹、胡桃、榛子、榿木、橡樹、山毛櫸、榆樹、山胡桃、白楊、紅雪松、白松、小無(wú)花果樹、櫟樹、柏樹、橄欖樹、接骨木等；草類包括：梯牧草、肯塔基蘭草、狗牙根、車前草、小糠草、羊茅草、小麥、大麥、玉米、豕草、菸草、艾蒿、蕁麻、刺藜、蒼耳、鴨茅等；花粉包括：黃菊、苜蓿、假豕草、蒲公英、向日葵、玫瑰、金盞花、野菊花、雛菊、芥菜、紅三葉草等；霉菌類包括：鏈格孢屬、曲霉、芽霉菌、單孢枝霉、毛霉、皰霉、假頭孢子、葡萄孢、根霉、長(zhǎng)蠕孢菌、根生菌、青霉菌、附球菌、梭霉菌、分枝孢子菌、彎孢霉、紅酵母、大麥黑粉菌、燕麥黑粉菌、小麥黑粉菌；其他還包括：煙草、棉花、報(bào)紙、木絲綿、蟑螂等。很多廠家在生產(chǎn)抗原時(shí)，會(huì)將多種同類抗原混合，合并為一種試劑。

抗原的種類繁多，且地理環(huán)境和生活方式的不同，不同地區(qū)的AD犬的陽(yáng)性反應(yīng)抗原差異很大，非常分散，很難制定統(tǒng)一的抗原檢測(cè)套餐。例如，貓上皮是廣泛分布的抗原，AD犬對(duì)此抗原的反應(yīng)率在某地為71%，而另一地為2%。同樣世界性分布的曲霉，不同調(diào)查的發(fā)現(xiàn)從84%到0%。

各地存在的抗原致敏率的差異可能是由于不同的生產(chǎn)廠家、不同的生產(chǎn)批次，以及不同的抗原生物活性導(dǎo)致的，另外，皮內(nèi)試驗(yàn)操作時(shí)的劑量和濃度也不盡統(tǒng)一，抗原制劑的佐劑也可能引發(fā)皮膚反應(yīng)。皮內(nèi)試驗(yàn)的假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果隨之出現(xiàn)。

總結(jié)皮內(nèi)試驗(yàn)檢測(cè)的抗原致敏率，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)一種特殊的抗原能夠被確定一定致敏，也沒(méi)有一種抗原能夠完全被排除出致敏行列。總的來(lái)說(shuō)，塵螨類和上皮類在歐美的調(diào)查中都是致敏率很高的抗原，而花粉和霉菌在美洲重要，在歐洲卻相對(duì)次要。